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第三节 中央实验室悬浮芯片系统的运用与掩护_荧光_暗记

乖囧猫 2024-12-19 01:44:33 0

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图5-3-36是Bio-Plex悬液芯片系统示意图,Bio-Plex悬液芯片系统将前辈的软件包,系统考验工具、微球耦联试剂和即用型细胞因子与磷酸化蛋白测试试剂整合在一起,使硬件、软件和检测试剂形成一个功能强大的芯片技能平台,大大提高了却果的精确性和可重复性,利用更加简便高效。
该系统为蛋白与核酸研究职员供应了灵巧的复合测试方案,可在单个样品中同时剖析多达100个生物分子。
利用100种不同颜色微球(xMAP技能)标记生物分子配体,每个微球可耦联一个对应不同靶分子的特异反应物。
反应物可以是酶底物、受体、抗原或者抗体。
检测范围0.2~3200pg/mL或1.95~32000pg/mL,自动的校正和校验工具可以担保样品间差异、板间差、系统间差异在10%以下,30min可以完成96个样品的检测并得到多达10000个剖析数据。
多重检测得到的数据可以完备揭示生命分子的相互关系及旗子暗记传导路子。

(一)技能事理

第三节 中央实验室悬浮芯片系统的运用与掩护_荧光_暗记 通讯

1.芯片事理

Bio-Plex悬液芯片的核心技能是把眇小的颗粒亦称微球(bead或microsphere)分别染身分歧的荧光色,然后再把针对不同检测物的蛋白质或寡核苷酸探针以共价的办法吸附到不同颜色的微球上。
微球直径为5.6μm,其制作过程按照严格的搭配比例掺入两种不同的赤色分类荧光染料,根据不同比例可以把球形基质分为100种,每种标上不同的探针分子,从而可以对一个样本中多达100种不同的目的分子进行同步检测。

在液相蛋白芯片中,先把针对不同检测物的不同颜色微球稠浊,然后加入被检测物,在悬液中微球与被检测物特异性结合,并加上荧光标记。
由于多种颜色微球可以放在同一反应体系中,以是可以同时对一份标本的上百个指标进行检测。
在液相基因芯片中,待测核酸可在聚合酶链式(PCR)扩增中直接加入荧光标记,经由与微球反应后可进行检测。

2.检测事理

如图5-3-37所示,微球被鞘流液体传送系统排成单列通过两束激光,一束剖断颗粒的颜色(分类激光)从而决定被测物的类型和性子(定性),另一束(报告激光)测定颗粒上的荧光标记强度,从而决定被测物的量(定量)。
所得旗子暗记经由光电倍增管后经电脑处理,所得数据可以直接用来判断结果。
两束激光分别剖析微球上的荧光颜色(特异性)和杂交旗子暗记(敏感性),而且激光只剖析颗粒一定半径的信息,以是检测特异性强,信噪比高,背景低。

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