PCR温控仪微流控芯片专家 - 苏州汶颢微流控技能株式会社性能解读
对普通PCR仪来说，温度掌握指标紧张是指温度的准确性、均一性、以及升降温速率。
温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的同等性，它直接关系到实验的成败。如果打消样品加入过程中的失落误操作问题，对付PCR反应而言最主要的莫过于温度掌握的准确性。
温度的均一性是指样品孔间的温度差异，它关系到在不同样品孔进行反应结果的同等性。
升降温的速率是指在PCR不同反应阶段温度升降的速率。显然，更快的升降温速率，可以缩短反应所需的韶光，而且有效降落由于升降温过程产生的非特异性结合、缩短了反应的韶光，能提高PCR反应的特异性。
但是，值得把稳得是仪器的升降温速率和样品管中的样品的升降温速率并非同一回事，由于样品管与基座打仗的紧密性、导热性、临近样品管的相互影响都会影响样品的实际升降温速率。
PCR实验常见问题及办理方法
1. 阴性对照和阳性对照都涌现阳性扩增带
缘故原由
①阴性样品和PCR 反应试验污染。
②电泳上样时避免PCR 产物漂移到其他孔而影响结果剖断。
办理方法
①改换全部试剂，必要时改换所有移液器。
②该当心操作，或琼脂糖凝胶加厚，增加每孔的容量，可避免加样液的溢出。
2. 阳性对照呈阴性
缘故原由
①阳性样品或加入阳性模板失落效。无论是组织还是血清，冻融1 次后病原数量明显减少。
②加入试剂量不准确或遗忘了某一身分。
办理方法
①将阳性对照样品分成小包装。每个包装够用1 次zui好。
②仔细核对试验记录，校正移液器。
3. 涌现非特异扩增带
缘故原由
①样品模板量过多。
②引物或TaqDNA 聚合酶多。
③镁离子浓度过高或退火温度过低。
办理方法：
依据详细实验的情形，剖析上述可能涌现的缘故原由，采纳相应的方法。
4. 阳性对照扩增带弱
缘故原由
①电泳时琼脂糖中EB含量少或永劫光后再用已失落效。
②扩增效率不高。
办理方法
①是将琼脂糖凝胶放入含有EB 电泳液中再染30 min 后再不雅观察。
②检测仪器是否正常事情。
③增加纯化DNA 或cDNA 样品的稀释倍数。
扩增效率不高的缘故原由
a.反应体系问题，操作中加入缓冲液、TaqDNA 聚合酶、引物等不准确，造成不能达到zui佳反应体系。
b.仪器不能正常事情。
c.样品处理过程中残留有较多PCR 反应抑制物造成的。多数情形是由于操作者怕PCR 不出阳性，故意无意提高PCR 检测样品量造成的。
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