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急了!病毒核酸提取有这么难吗?师姐带你25分钟搞定!_核酸_样本

雨夜梧桐 2024-12-24 23:55:21 0

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1、样本特异性:不同类型样本的身分不同,可能会导致提取效果差异。
办理方法包括:

(1)优化样本网络和保存方法,确保样实质量。

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(2)不同类型的样本采取不同的前处理办法。

2、样本处理中的污染:样本中存在其他生物学物质和化学物质,如蛋白质、血红素等,可能对提取过程产生滋扰。
办理方法包括:

(1)利用去污剂或蛋白酶进行样品预处理。

(2)优化提取试剂盒中的缓冲液组成和浓度,以最大限度减少污染物的影响。

3、病毒核酸的低浓度:某些病毒在传染早期或治疗后浓度较低,这可能会导致提取后核酸浓度不敷。
办理方法包括:

(1)增加起始样本量。

(2)对付低浓度样本,可以利用特定的预处理步骤,如浓缩、扩增等。

4、技能限定:传统的病毒核酸提取技能可能存在一些限定,如操作繁琐、韶光耗费长等。
办理方法包括:

(1)探索新的提取技能,如自动化提取仪器或微流控芯片技能。

(2)优化已有的提取方法,简化步骤和减少操作韶光。

磁珠法核酸提取事理

利用纳米技能,对超顺磁性纳米颗粒的表面进行表面润色制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
核酸结合到磁珠上紧张依赖静电浸染。
在盐离子和外加磁场的浸染下,能从样本等分离出核酸,并洗去非特异性吸附的杂质,得到纯化后的核酸。

磁珠法提取流程

产品简介

凡知医学的病毒DNA/RNA总核酸提取试剂盒(磁珠法)采取自主研发的磁珠分离纯化技能和独特的裂解液与缓冲体系,可同时提取样本中的DNA/RNA。
适用于多种临床样本病毒总核酸的提取,可直接用于下贱分子生物学实验,包括PCR、qPCR、RT-PCR、芯片检测等。

病毒DNA/RNA总核酸提取试剂盒(磁珠法)

产品上风

· 大略快速:全体提取操作过程在25分钟之内可完成。

· 灵敏度高:既可得到的高纯度病毒DNA/RNA,同时能够成功提取病毒中低拷贝数的核酸。

· 适用广泛:支持血清、血浆、尿液、CSF、痰液、肺泡灌洗液、拭子浸泡液、培养液上清等无细胞或低细胞含量的液体样本。

· 过程安全:不涉及氯仿、酚等有毒有机试剂。

· 场景灵巧:支持手动提取及高通量全自动核酸提取仪配套利用。

案例展示

通过对RSA病毒进行梯度稀释,在同等病毒浓度下横向对照凡知医学试剂盒与美国A公司试剂盒,结果显示两者Ct值基本同等,结果准确可靠。

凡知试剂盒与美国A公司试剂盒ct值比拟

通过对获取病毒DNA/RNA进行扩增曲线试验,结果显示在不同浓度下提取病毒DNA/RNA呈线性分布,性能均一, 样本间差异小。

扩增曲线试验结果展示

几种常见的提取结果及办理方案

结果1:提取效率低,无法得到足够的病毒核酸。

办理方案:

(1)检讨样品处理是否精确,确保样品含有足够的病毒。

(2)考虑利用更好的提取试剂盒或方法,以提高提取效率。

(3)优化提取步骤的韶光和温度,根据不同病毒类型进行调度。

结果2:反应受到污染,涌现假阳性结果。

办理方案:

(1)严格掌握实验室的无菌操作,避免外源性污染。

(2)利用RNase-free和DNase-free的试剂和花费品,确保反应体系不受核酸酶的污染。

(3)设立阴性对照,打消可能的污染来源。

结果3:提取效果不稳定,存在批间差异。

办理方案:

(1)保持实验条件的同等性,包括温度、韶光、试剂浓度等。

(2)严格按照实验操作步骤进行操作,避免人为偏差。

(3)定期验证提取试剂盒的质量和性能,确保每个批次的质量稳定。

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